穿山龙现代研究概况

王宝庆,李学彬,田志发,孙凯云,邢桂菊,高文远

(1.天津大学药物科学与技术学院,天津 300072;2.牡丹江市药品检验所,黑龙江 牡丹江 157011)

穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino.)的干燥根茎。味甘苦温,具有祛风湿,止痛,舒筋活血,止咳平喘祛痰功效。主治风湿性关节炎,筋骨麻木,大骨节病,跌扑损伤,慢性支气管炎、咳嗽气喘。民间多用其浸酒或煎服,为东北地区常用草药。穿山龙中含有薯蓣皂苷元,也是较好的合成甾体激素药的原料之一[1],现已成为医药工业原料。本文从7个方面综述现代研究进展。

1 生药学研究

穿山龙在历代本草著作中无此药名,《植物名实图考》所载穿山龙非薯蓣科植物。今考证《图经本草》中所指的成德军萆薢很可能就是这一种,因《名医别录》载“生真定山谷”,即今河北正定县;再从薯蓣科植物在我国的分布来看,我国黄河以北,除山药(Dioscorea opposita Thunb.)外,只有穿龙薯蓣(D.nipponica Miq.)一种。

2 化学成分

根茎主要含薯蓣皂苷(Dioscin)、薯蓣皂苷元(Diosgenin)、25-△-螺旋甾-3,5-二烯(25-△-Spirosta-3,5-diene)、纤细薯蓣皂苷(Gracillin)、穗菝葜甾苷(Asperin)、25-D-螺甾-3,5-二烯(25-D-Spirosta-3,5-diene)及对羟基苄基酒石酸(Piscidic acid)[2-4]。总皂苷水解产生薯蓣皂苷元(Diosgenin)。薯蓣皂苷元的平均含量为0.93%～2.26%[5]。

3 成分分析

3.1 鉴别

3.1.1 检查皂苷。取本品粉末约2g,加入水30m L,水浴上加热10min,滤过。取水提液2m L,置于具塞试管中,振摇1min,产生大量蜂窝状泡沫,放置10min,泡沫没有明显的消失。

3.1.2 检查皂苷。取上述水提取液2m L,加入2%红血球混悬液5～10滴,放置数min,血液逐渐被溶解使得提取液呈红色透明液。

3.1.3 检查皂苷。取本品粉末2g,加80%乙醇加热浸提,过滤,滤液蒸去乙醇,放冷,残渣溶于少量醋酸中,加醋酐和浓硫酸数滴,应呈紫红色。

3.1.4 薄层色谱。样品制备:取本品粉末5g,加2mol/L盐酸约60m L,水浴上加热水解3.5h,放冷滤过,残渣用水洗至中性,烘干(80～100℃),加石油醚(60～90℃)回流提取4h,提取液蒸干后,残渣用氯仿溶解至l0m L。吸附剂;1%CMC硅胶板。展开剂∶氯仿-丙酮(93∶7)。显色剂:3%磷钼酸溶液,加热后显蓝色。结果有与薯蓣皂苷元和25-D-螺甾-3,5-双烯相对应的斑点[6]。

3.2 含量测定

3.2.1 重量法。将新鲜样品100成薄片,加等量水高速搅拌5min,加3.5mol/L盐酸溶液115m L回流水解3h,室温冷却后,用布氏漏斗过滤,残渣用水50m L洗8～10次后干燥。将此干燥的残渣置沙氏提取器中用石油醚(30～60℃)提取8h,将提取液浓缩至10m L,在室温放置2h,此时有薯蓣皂苷元的白色结晶析出,垂熔漏斗过滤,结晶用溶剂洗2次,在室温放置30min,105℃干燥30min后称重,计算薯蓣皂苷元的含量。

3.2.2 比色法。薯蓣皂苷元可与下列试剂显色;甲醛-硫酸、改良的Liebermann试剂、硫酸、浓硫酸-甲醇、三氯化锑的硝基苯溶液、高氯酸-70%高氯酸-24%五氯化锑的70%高氯酸溶液以及茴香醛乙醇溶液-磷酸,可利用这些颜色反应进行比色测定。有浓硫酸-甲醇法、改良的Liebermam试剂法、三氯化锑法。

3.2.3 薄层扫描法。取样品提取液点在硅胶G薄层板上,以羊毛甾醇为内标物,浓度为 6.67μg/10μL,以已烷-丙酮(4∶1)为展开剂,展开后在空气中干燥10min,喷饱和的三氯化锑氯仿溶液。在 100℃加热8min,40min后在470nm测定斑点面积。

3.2.4 高效液相色谱法。穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的含量测定 。

3.2.4.1 色谱条件。Shim-pacd CLC-Sil色谱柱(150mm×6.0mm),流动相:石油醚-异丙醇(98∶2),检测波长:206nm,流速:l.2m L/min,灵敏度0.08AUFS,柱温:室温。

3.2.4.2 色谱条件[7]。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相∶乙腈-水(55∶45);检测波长:203nm。

3.2.5 毛细管气相色谱法。穿龙薯蓣总皂苷中薯蓣皂苷元的含量测定[8]。

色谱条件与系统适应性试验。色谱柱为HP-1(Methylsiloxane)30.0m ×320μL×0.25μm 不锈钢毛细管柱,柱温 2700C,柱头压23.7kPa,汽化室温度330℃,检测器温度310℃,载气(N2)流速2.0m L/min,分流比40∶1,进样量2μL。在本色谱条件下,对照品峰与杂质峰没有重叠,分离效果好(分离度为11.21),分析速度快(tR约为6.40min),理论塔板数按薯蓣皂苷元计算为28756(n=3,RSD=l.6%)。

4 制剂

其制剂有穿山龙片、穿山龙注射液、穿山龙冠心灵等。

5 药理研究

5.1 免疫调节

穿山龙对细胞免疫及体液免疫均有抑制作用。给小鼠连续7日皮下注射15g/kg煎剂,出现小鼠胸腺萎缩,淋巴细胞数减少,井抑制二硝基氯苯诱导皮肤迟发型超敏反应细胞免疫和溶血素的形成(体液免疫)。穿山龙不但对特异性免疫功能有抑制作用,还对非特异性免疫功能有增强作用,使小鼠腹腔巨噬功能及血清溶菌酶水平升高。

5.2 抗动脉粥样硬化

给正常猫及实验性动脉粥样化兔灌服或静脉注射薯蓣总皂苷5g/kg后,可使血浆胆固醇下降,减轻主动脉脂质浸润[9]。

5.3 其他药理作用

5.3.1 毒性。小鼠静注总皂苷 LD50为750mg/kg,小鼠灌服总苷60～180mg/kg共7周,对血浆、肝功及主要脏器无影响[9]。

5.3.2 止咳祛痰、平喘。复方注射液可用于老年慢性气管炎[9]。

5.3.3 强心。提取物及总皂苷可使离体和在体蛙心收缩加强,使血管扩张[9]。

5.3.4 抗菌抗病毒。水煎剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、卡他球菌、脑膜炎双球菌,甲链球菌及流感病毒等有明显抑制作用[10]。

6 临床研究

6.1 治疗类风湿性关节炎

穿山龙注射液(1g/m L,2m L)肌注治疗类风湿性关节炎45例,显效率40%,好转率43.3%,总有效率83.3%,无明显副作用,近期疗效较好[11]。民间用本品泡酒煎服,治疗筋骨麻木,风湿痹痛。

6.2 治疗冠心病心绞痛

穿山龙根茎以水及乙醇为溶剂提取,经乙醚沉淀制得穿龙冠心宁。经临床证明,对冠心病心绞痛有显著疗效,有效率为90.68%;对心悸、气短、胸闷等症状有较好疗效,有效率为77.30%,能改善冠状动脉供血不足;对冠心病合并高血压有一定降压作用,对高甘油三酯血症有较好疗效[12]。四川生物研究所用复方穿山龙冠心灵治疗冠心病、心绞痛等也有较好疗效。

6.3 治疗慢性支气管炎

穿山龙饮片水煎剂治疗37例,总有效率为86%;穿山龙片治疗142例者,有效73例,占61%,显效以上47例,占33%。从分型来看,对单纯型和虚阻型疗效较高,有效率分别为86%和82%。对咳、喘、痰均效果良好,对反复感染的痰阻型效果很差。其作用特点是起效较慢,但持续时间长。此外,还可使患者食欲增加,握力增加。对感冒引起的急性发作,合并呼吸道感染咯黄痰者,单用穿山龙效果不够明显,加服黄芩水煎液则疗效显著[13]。

6.4 治疗慢性布鲁菌病

许友璋报道了用穿山龙、秦艽、黄芪制成复方穿山龙注射液治疗布鲁菌病68例,治愈率75%[14]。

6.5 治疗脂肪瘤

用穿山龙250g,在2000m L 60度的白酒中浸泡半月,治疗一肩周炎患者,结果对肩周炎疗效不大,但患者臀部20余年的鸡蛋大的脂肪瘤竟意外地变软、缩小,连服3个月,瘤体全部消失,在此期间患者未服其他药物[15]。

7 小结和讨论

综上所述,20世纪80年代以前对穿山龙的研究侧重于其有效成分、药理和临床应用方面,取得了许多有价值的成果,但多是单味药的研究。有必要运用现代分析手段,加强其复方配伍的研究。由于甾体激素类药物的临床疗效独特,穿山龙中薯蓣皂苷元又是合成甾体激素的主要原料之一,薯蓣皂苷元的发现和利用为获得资源丰富和经济的天然甾体原料开辟了途径。因此,人们逐渐开始重视穿山龙的资源开发,从穿山龙有性繁殖的研究、生物学特性、野生变家种的试验等探讨其驯化为人工栽培的可能性和必要性;同时,不断地探索薯蓣皂苷元和薯蓣皂苷的提取工艺,提高其产率。如果能利用现代制剂技术,研制出高效的穿山龙新制剂,提高对这些疾病的远期疗效,将有着重要的科学价值和社会意义。

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