赖型钩端螺旋体外膜蛋白Loa22诱导细胞凋亡Ca2+信号通路机制

吴秉婷,孙 湛,李道坤,鲍 朗

(四川大学基础医学与法医学院病理生理,四川成都610000.E-m ail:baolang@scu.edu.cn)

赖型钩端螺旋体外膜蛋白Loa22诱导细胞凋亡Ca2+信号通路机制

吴秉婷,孙 湛,李道坤,鲍 朗

(四川大学基础医学与法医学院病理生理,四川成都610000.E-m ail:baolang@scu.edu.cn)

目的:探讨赖型钩端螺旋体外膜蛋白Loa22对人肺泡II型上皮细胞(A549)[Ca2+]i影响造成的细胞凋亡,初步揭示该蛋白作用细胞可能的信号机制。方法:采用特异阻断剂U73122预处理A549,阻断PLC-γ1激活细胞内Ca2+释放的信号通路,以Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,Fluo 3/AM标记流式细胞仪检测细胞内游离钙,评估[Ca2+]i变化与细胞凋亡的关系;以FITC-鬼笔环肽荧光染色,观察F-actin排列结构影响;检测钙调素(Ca M)mRNA表达量变化。结果:直接以Loa22成熟肽作用A549能引发[Ca2+]i上升,细胞凋亡率升高;阻断PLC-γ1信号通路后以Loa22成熟肽作用A549,[Ca2+]i较不阻断时降低,凋亡率减小,CaM mRNA表达量降低(P＜0.01)。结论:Loa22成熟肽作用机制可能通过PLC-γ1信号通路触发细[Ca2+]i升高,导致F-actin重排,促使Ca M mRNA表达增加,提示该基因参与钩端螺旋体侵袭细胞引发细胞凋亡的病理过程。